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[其它内容] PCR医学检测实验案例介绍 [复制链接]
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发表于 2024-8-23 14:51:14 | 显示全部楼层 |阅读模式 来自 中国浙江杭州
产品介绍:
适用于合成Realtime PCR用cDNA的逆转录试剂盒。
本试剂盒是适用于Realtime PCR用cDNA制作的逆转录反应试剂盒。由于采用了本公司
高性能逆转录酶『ReverTra Ace』,反应效率非常出色。另外,通过改良,使得带入到
Realtime PCR反应体系中的逆转录反应液的影响降到小,即使在PCR反应体系中添加
了多至20%体积的逆转录反应液,也能表现出良好的反应曲线,因此,适合用于表达量
较少的mRNA的高灵敏度测试。由于精简了试剂盒的构成,可非常简便地进行操作,仅需
约15分钟的逆转录反应,即可得到充分的cDNA。
特征1. 超群的cDNA合成效率
由于使用了恰当比例的mix primer(oligo dT和Random primer)、以及经改良的反应缓冲液,可实现高效率的逆转录反应。
特征2. 反应时间仅需15分钟
逆转录反应仅需15分钟即可完成。此外,即便是要除去对Realtime PCR反应有阻碍的残留的模板RNA,也无须追加RNase H处理。
特征3. 提高了和Realtime PCR试剂的适应性
通过改良,使带入到Realtime PCR反应体系的逆转录反应液的影响降到小。即使在PCR反应体系中添加了多至20% (V/V)的逆转录反应液,也能表现出良好的反应曲线。因此,适合用于表达量较少的mRNA的高灵敏度检测。
FSQ-101东洋纺TOYOBO ReverTra Ace qPCR RT Kit Realtime PCR用cDNA合成试剂盒
规格参数Specifications
实验例1 与用其他公司产品cDNA合成量的比较
以来源于HeLa细胞的total RNA 100ng为模板,根据各公司试剂盒推荐的条件进行逆转录反应。然后,在Realtime PCR反应液(使用本公司SYBR Green Realtime PCR Master Mix)中分别添加上述的逆转录反应液各1% (V/V),用Realtime PCR对β-Actin和Polymerase ε的cDNA量进行定量。结果可见,在使用本试剂盒的情况下,两个目的片段都有high的收量。
实验例2 RNase H处理与否对检测灵敏度影响的比较
以来源于HeLa细胞的total RNA 100ng为模板,使用ReverTra Ace qPCR RT Kit(蓝线)及另外添附RNase H的B公司cDNA合成试剂盒,按各自推荐的实验步骤进行逆转录反应(B公司试剂盒分别按RNase H处理(红线)/未处理(橙线)两种方法进行)。然后,按和实验例1同样的方法检测β-Actin的扩增效果。结果显示,用B公司的试剂盒RNase H未处理(橙线)的情况下,检测效果大幅下降。而用ReverTra Ace qPCR RT Kit(蓝线)进行反应,即便不追加RNase H处理也能显示出很高的扩增效率。已经过实验证明,用本试剂盒的情况下,RNase H处理与否灵敏度相等。
※本试剂盒不包含RNase H处理步骤。
产品资料来源:[url]http://www.bio-fushen.com/fushen-Products-29894800/[/url]
[url]https://www.chem17.com/st262900/product_29894800.html[/url]
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发表于 2024-8-30 10:28:27 | 显示全部楼层 来自 中国河南开封
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