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PCR技术的定量原理：  
扩增曲线  
在Real-qPCR中，对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号，随着反应的进行，监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线，即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。  
在Real-timeqPCR扩增早期，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化，此时即为基线期。  
PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的，随着反应循环数的增加，终PCR反应不再以指数形式生成模板，从而进入“平台期”。在该时期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系，所以根据终的PCR产物量不能计算出初始模板量。  
荧光染料的优点：  
产品仅用于科研使用简便；  
可以与任何PCR产物结合；  
价格便宜；  
荧光染料的缺点：  
不能区分不同的双链DNA  
引物二聚体会影响检测的敏感性  
非特异性产物会影响结果的敏感性  
引物二聚体和非特异性扩增问题可以通过熔解曲线(Meltingcurve)进行识别，进而通过PCR引物的设计和反应条件的优化得以解决。总的来说，SYBRGreenI方法是一种基础也的Real-timeqPCR实验手段。

更多：探针法荧光PCR检测试剂盒
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